烟草遗传转化

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烟草遗传转化

一、实验原理:

1.稳转株:采用农杆菌介导的方法,用携带有目的基因载体的农杆菌感染烟草外植体,经过多次抗性筛选,得到阳愈苗,最终生长得到阳性转基因植株;

2.瞬时转染:采用农杆菌介导的方法,用携带有目的基因载体的农杆菌感染烟草外植体,经过PCR验证检测等,得到阳愈苗,最终生长得到阳性瞬时转基因植株;


二、客户提供材料

目的基因序列,或者已构建好的载体,以及相关载体信息;提供相关品种的种子


三、实验步骤(稳转):

1、准备好烟草叶片(无菌苗);

2、农杆菌叶盘法转化;

3、外植体进行分化培养基培养;

4、转移至筛选培养基筛选(3-5次);

5、转移至生根培养基(3周);

6、转移至培养土中。


四、实验验证:

PCR验证检测载体是否已经转入。


五、结果呈现:

交付客户阳性苗5-15颗,以及检测结果。

客户有特殊要求,可以代养并收到T0种子。


六、周期

4-6个月.(根据客户实验需求而定)。


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